Εργαστήριο Αιματολογίας 1

Σε αυτά τα τόπικ θα γράφω τις σημειώσεις μου από τα εργαστηρία, θέλωντας έτσι να βοηθήσω τα άλλα μέλη που δεν διάβασαν το αντίστοιχο βιβλίο να πάρουνε γενικές γνώσεις που πιστευω ότι, όπως βοήθησαν εμενα να πάρω ενα καλο βαθμό στο μάθημα ίσως βοηθήσουν και αυτούς!!
Κάτι σαν μια γρήγορη επανάληψη του μαθήματος με κάποια bonus!!

ΜΑΘΗΜΑ 1

Γενική Αίματος: Αιμοσφαιρίνη: HB
Αιματοκρίτης: HT
Μέτρηση Λευκών: RBC
Μέτρηση Ερυθρών: WBC
Λευκοκυτταρικός Τύπος(Λ-Τ)
Αιμοπετάλια: PLT
Εξεταζόμενο αίμα σε σωληνάριο με EDTA για τη γενική αίματος!!
ΑΙΜΟΛΗΨΙΑ
Α.* Δείγμα αίματος προς εξέταση Α.* 1)Τριχοειδική Αιμοληψία
2)Φλεβική Αιμοληψία
Β. Για μετάγγιση (από το χέρι)

ΑΝΤΙΠΗΚΤΙΚΑ
• Ηπαρίνη: α) Πρόληψη αιμόλυψης
β) Ωσμωτική αντίσταση ερυθρών
• Sodium Citrate: α) Δοκιμασίες Πήξης (PT, PTT, ινωδογόνο)
β) Μεταγγίσεις
γ) Χρόνος Πήξης
• EDTA: WBC, RBC, PLT , Ταχύτητα Καθίζησης Ερυθρών( Τ.Κ.Ε)
• WINDROBE: Υστερεί του ΕΔΤΑ
Γρήγορη αρίθμηση έμμορφων συστατικών του αίματος
• ΟΞΑΛΙΚΑ ΑΛΑΤΑ: Σε διάφορους χημικούς προσδιορισμούς

Παράγοντες που επηρρεάζουν την αιμόλυση

1. Πριν την αιμοληψία
Παρατεταμένη περίδευση του βραχίονα με ελαστικό σωλήνα
Αυξημένη πίεση γιατί προκαλεί αιμοσυμπύκνωση

2. Κατά τη διάρκεια της αιμοληψίας
Είσοδος αέρα
Το απότομο τράβηγμα του εμβόλου

3.Μετά την αιμοληψία
Η βίαιη μεταφορά του αίματος από την σύρριγγα στο ειδικό σωληνάριο
Η υγρασία των βελονών, συριγγών και σωληναρίων συλλογής αίματος
Η μεγάλη παραμονή δειγμάτων σε θερμοκρασία δωματίου

ΠΡΟΣΟΧΗ!!!
Σωληνάριο με αντιπηκτικο - ήπιες κινήσεις στην ανάδευση
Σωληνάριο χωρίς αντιπηκτικό - καθόλου ανάδευση(ανάμειξη)

ΔΙΑΧΩΡΙΣΜΟΣ ΟΡΟΥ - ΠΛΑΣΜΑΤΟΣ
1) Ολικό
2) Πλάσμα: σωληνάριο ΜΕ αντιπηκτικό (για 10' στις 3000 στρ)
3) Ορός: σωληνάριο ΧΩΡΙΣ αντιπηκτικό (για 10' στις 3000 στρ)

Είδη δείγματος αίματος

ΟΛΙΚΟ: Έμμορφα (ερυθρά, λευκά, αιμοπετάλια)
ΠΛΑΣΜΑ: Άμμορφα (H2O, οργανικές και ανόργανες ουσίες με ινωδογόγο)
ΟΡΟΣ: Άμμορφα (χωρίς ινωδογόνο)

ΑΝΟΡΓΑΝΕΣ ΟΥΣΙΕΣ: Διάφορα άλατα, στοιχεία (K, Ca, Na+, P)
ΟΡΓΑΝΙΚΕΣ ΟΥΣΙΕΣ: γλυκόζη, λίπη, αμινοξέα ουρία, πρωτεΐνες(α1, α2, β1, β2, γ)

BONUS: Το αντιπηκτικό χρησιμεύει στη διατήρηση του ινωδογόνου που υπάρχει στο πλάσμα.
BONUS: Η αιμοσυμπύκνωση οδηγεί σε αύξηση της ινωδολυτικής δραστηριότητας και ενεργοποίηση των παραγόντων πήξεως (Αιματολογία 3)

Έκπλυση ερυθρών αιμοσφαιρίων

Αίμα + Αντιπηκτικό
Φυγοκέντρηση 3000 στρ/min - 5 min
Πετάμε το υπερκείμενο* (πλάσμα) ή το κρατάμε σε καθαρό σωληνάριο
Στο ίζημα (ερυθρά) προσθέτουμε 2ml φυσιολογικό ορό (NaCL 0,9%) και φυγοκεντρούμε στις 3000 στρ/min - 5 min
Χύνουμε το υπερκείμενο και επαναλαμβάνουμε τις πλύσεις άλλες 2 φορές. Σύνολο 3.

*Το τελευταίο υπερκείμενο να είναι διαυγές. Το ίζημα που παραμένει είναι από τα εκπλυθέντα ερυθρά.

Φ.Ο: Ισότονο διάλυμα NaCL
9 gr - 1000 ml H20
ή 0,9 gr - 100 ml H20

Εναιώρημα Ερυθρών (απαραίτητο για τη γενική αίματος αλλά και για την αραίωση ερυθρών)

Αίμα + Αντιπηκτικό
Διαχωρισμός πλάσματος - έκπλυση ερυθρών(ε.ε)
Αραίωση εκπλυθέντων ερυθρών με φυσιολογικό ορό 20%, 5%, 2%
Π.Χ. Σύνολο 100 ml εναιωρήματος σημαίνει: Φ.Ο 80% ml - ε.ε 20 ml
95% ml - ε.ε 5 ml
98% ml - ε.ε 2 ml

ΑΙΜΟΛΥΜΑ ΕΡΥΘΡΩΝ(Απαραίτητο σε περίπτωση ηλεκτροφόρησης ερυθρών για μέτρηση αιμοσφιαρίνης (Α ή Α1 97%), (Α2 3%), (F 1,5%)
Αίμα + Αντιπηκτικό
Διαχωρισμός πλάσματος - εκπλυση ερυθρών
Προσθέτουμε σε ένα σωληνάριο 1,5 ml (A.D (απεσταγμένο νερό)) + 0,5 ml ερυθρά
0,5 ml τετραχλωράνθρακας (οξύ)
Ισχυρή ανακίνηση για 2 min
Διαχωρισμός αιμολύματος
Μέτρηση της αιμοσφαιρίνης του αιμολύματος

Μέθοδος Μικροαιματοκρίτη (HT στο χέρι),(HCT στον αναλυτή)

Αιματοκρίτης: Η εκατοστιαία αναλογία ερυθρών προς το συνολικό όγκο αίματος ή αλλίως θα μπορούσαμε να πούμε της ποσότητας των έμμορφων συστατικών προς τον συνολικό όγκο αίματος

ΥΛΙΚΑ ΚΑΙ ΟΡΓΑΝΑ
1)Αίμα φλεβικό + αντιπηκτικό (E.D.T.A) ή Αίμα τριχοειδικό + αντιπηκτικό (Ηπαρίνη)
2) Τα τριχοειδή σωληνάρια χωρίζονται σε μπλε, άνευ αντιπηκτικού(E.D.T.A) και στα κόκκινα(Ηπαρίνη)
Τι σημαίνει ανευ αντιπηκτικου! Επειδή η αιμοληψία είναι φλεβική, άρα το σωληνάριο που θα τοποθετήσουμε το αίμα αμέσως μετά την αιμοληψία θα περιέχει ήδη αντιπηκτικό (Ε.D.Τ.Α), το μπλε σωληνάριο είναι ΑΔΕΙΟ. Από την άλλη μεριά το κόκκινο είναι ηπαρινησμένο.

3)Πλαστελίνη
4) Μικροφυγόκεντρος (12,500 στ/min - 5 min)
5) Συσκευή μέτρησης μικροαιματοκρίτη (HT) - μικροφυγόκεντρος
Φ.Τ Άνδρες: 40 - 50%, Γυναίκες: 37 - 47%